| Leukemie is een vorm van kanker die zich in het beenmerg ontwikkelt. Kinderen met een acute myeloide leukemie (AML) hebben een slechte prognose. Bij veel kinderen wordt the AML tijdens de behandeling chemotherapie resistent door evolutie van maligne eigenschappen van de AML blasten. En minstens 40% krijgt een AML recidief ondanks de goede response op de standaard intensieve chemotherapie. Een recidief is gedacht voort te komen uit hernieuwde groei van de leukemische stam cel (LSC). Nieuwe strategieen zijn dus noodzakelijk. Vasculaire endotheliale groei factor-A (VEGF-A) is een belangrijke groeifactor, ook in AML en het prototype van de VEGF familie. VEGF-A expressie in AML blasten is gecorreleerd aan een verhoogde vaatnieuwvorming in het beenmerg. De vaatdichtheid keert weer terug tot normale proporties als een complete remissie is bereikt. VEGF-A kan ook de overleving van de AML blasten verhogen en groei induceren. Een VEGFafhankelijke autocriene stimulerende route is aangetoond. In AML blasten is VEGF-A een onafhankelijke prognostische factor voor overleving. Het gebruik van VEGF receptor (VEGFR) inhibitoren laat zelfs partiele of soms complete remissies van AML zien. In deze aanvraag willen we de rol van VEGF/VEGFR signalering bestuderen in relatie tot evolutie naar meer resistante AML blasten. In voorbehandelde NOD/SCID muizen laten we AML cellen groeien. Deze AML cellen zijn getransfecteerd met een vector die VEGF tot overexpressie brengt of een controle vector. De mate van VEGF afhankelijkheid op progressie tot meer resistente AML wordt uitgelezen aan de hand van tumorgroei en overleving van de muizen. Het potentieel remmend effect van VEGF remmers wordt bestudeerd in dit muizen model door de muizen zonodig een dergelijke remmer via het drinkwater toe te dienen. De tumoren die gegroeid zijn in de muizen worden geanalyseerd met gene arrays op meer maligne eigenschappen die aanleiding geven tot meer resistente AML. Door de groep tumoren met VEGF overexpressie te vergelijken met tumoren met de controle vector is het mogelijk de invloed van VEGF op toenemende maligne ontwikkeling te detecteren. Ook zullen gene arrays verricht worden op AML blasten van kinderen bij diagnose van AML in samenwerking met SKION nederland. Het effect van VEGF en VEGFR expressie op gen expressie profielen kan dan worden bestudeerd. Ten tweede willen we bestuderen of VEGF/VEGFR signalering de uitgroei van leukemische stam cellen (LSC) bevordert resulterend in een AML recidief. LSC worden gekarakteriseerd door the potentie tot self renewal. Met in vitro cocultuur systemen zijn we in staat te laten zien dat LSC zichzelf kan vermeerderen. VEGF afhankelijkheid zal kunnen worden bestudeerd door de uitgroei van de LSC zonder VEGFR inhibitor te vergelijken met de uitgroei van de LSC met VEGFR inhibitor. Na retrovirale transfectie met een Luc+ vector van de LSC zullen we ook gedurende het leven van de muis uitgroei van de LSC kunnen volgen middels bioluminiscentie. Opnieuw zal de invloed van VEGF op de uitgroei bestudeerd kunnen worden middels gebruik van de VEGFR inhibitor of middels het gebruik van een vector die niet alleen Luc+ is maar ook VEGF+. De resultaten van dit onderzoek zullen meer licht werpen op de invloed die VEGF/VEGFR signalering heeft in de evolutie van AML tot een meer chemotherapie-resistente ziekte, als wel in het ontstaan van een AML recidief. Nieuwe therapie strategieen met name gericht op LSC zullen de prognose van AML patienten verbeteren. |
