Doel
Een cel-biosensor is een gemodificeerde bacterie die als reaktie op de aanwezigheid van een bepaalde stof, genen aanschakelt die een luminescentie signaal veroorzaken. De expressie van deze luminescentie genen wordt geregeld door een zgn. transcriptie regulator, en is gebaseerd op een direkte binding tussen de te detecteren stof en de regulator. Cel-biosensors vormen een aantrekkelijke snelle en goedkope manier om contaminanten in o.a. voedsel op te sporen. Bottleneck in de ontwikkeling van nieuwe cel-biosensors is het ontbreken van geschikte regulatoire elementen. Doel van dit project is het opzetten van een selectiemethode voor nieuwe regulators die gebruikt kunnen worden voor de constructie van cel-biosensors met alternatieve specificiteit.
Werkwijze
Selectie zal plaatsvinden met behulp van faag-display. In eerste instantie zal als "proof of principle' een bekende regulator tot expressie worden gebracht in het faag-display systeem en zal binding met het betreffende target worden aangetoond. Vervolgens zal vanuit het genoom van een bacterie een faag-bank worden geconstrueerd, waarmee een affiniteitsselectie op een aantal antibiotica zal worden uitgevoerd. Het uitgangsmateriaal en de antibiotica worden zo gekozen, dat er theoretisch in elk geval één match zou moeten optreden.
Resultaten
Beoogde resultaat: selectiesysteem voor nieuwe regulatoire elementen voor toepassing in cel-biosensors.
Publicaties bij dit project zijn beschikbaar via deze Link |
